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SPR 在抗肺炎球菌莢膜多糖(anti-PnPs)IgG 定量方面的可靠性!

2025-06-22 點擊數:0 分享至:


近年來,肺炎球菌疾病在全球范圍內呈現上升趨勢,對肺炎球菌疫苗的反應通常使用多型酶聯免疫吸附試驗(ELISA)肺炎球菌檢測法來測量。然而,這種方法存在一些局限性,包括使用多種試劑、假陽性/陰性結果率高以及實驗時間長(約 小時)。因此,引入能提供肺炎球菌疫苗療效信息的更強大的新分析方法將非常有利于患者的臨床管理。過去幾年的研究表明,表面等離子體共振 (SPR) 能為了解疫苗特性提供有價值的信息。2021年發表的“A surface plasmon resonance based approach for measuring response to pneumococcal vaccine”旨在探索表面等離子體共振(SPR)技術在測量肺炎球菌疫苗(如PCV13)響應中的應用潛力,以期為臨床管理提供新工具。



該研究旨在評估SPR 在疫苗接種者抗肺炎球菌莢膜多糖(anti-PnPsIgG 定量方面的可靠性。研究采用快速蛋白液相色譜法(FPLC)從接種疫苗的患者血清樣本中分離總 IgG。為了研究抗 PnPs IgG 與 PCV13 之間的相互作用,進行了結合SPR 試驗。通過酶聯免疫吸附法測定的血清中抗 PnPs IgGs 水平與 SPR 信號之間存在很強的相關性。此外,還能根據患者對 PCV13 的特定 SPR 反應譜將其正確分為 “非應答者”、“應答者 ”和 “高應答者 ”三組。SPR 技術為在極短的實驗時間內可靠地描述抗 PnPs IgG 與 PCV13 之間的相互作用提供了寶貴的工具。



實驗設計與方法



樣本選擇:研究納入了24名接種PCV13疫苗的患者,根據ELISA測定的抗肺炎球菌莢膜多糖(PnPsIgG水平,將患者分為非應答者、應答者和高應答者三組。


實驗流程:


IgG提取:使用快速蛋白液相色譜(FPLC)從血清樣本中提取總IgG


SPR芯片準備:PCV13通過胺化學方法固定在CM5傳感器芯片上。


SPR實驗:將不同稀釋度的IgG樣本注入SPR系統,監測其與PCV13的結合情況。



實驗結果與分析



相關性分析:研究發現,SPR信號與ELISA測定的抗PnPs IgG水平之間存在顯著相關性(Spearmans rho = 0.84, p = 0.001)。


分組比較:不同應答組患者的SPR結合曲線存在顯著差異,能夠準確區分非應答者、應答者和高應答者。


優化條件:樣本稀釋度對SPR實驗結果有顯著影響,1:16稀釋度被證明為最佳條件,具有最低的非特異性結合和最佳的信噪比。



圖片

SPR技術原理與優勢



技術原理:SPR技術基于光學現象,當偏振光照射到金屬(如金或銀)涂層表面時,生物分子在傳感器表面的結合會改變折射率,進而引起共振角或共振波長的變化。



優勢概述



高靈敏度:能夠檢測納克級別的特異性IgG抗體。


快速響應:實驗時間極短,僅需2分鐘即可完成。


成本效益:傳感器芯片可重復使用,適合大規模檢測。



討論與展望



SPR技術的優勢:相比傳統ELISA方法,SPR技術具有更高的靈敏度和更短的實驗時間,且成本效益更高。


臨床應用前景:
SPR技術有望成為評估疫苗響應的新標準,為疫苗研發和臨床管理提供有力支持。


未來研究方向:未來研究將進一步探索SPR技術在不同疫苗和接種方案中的應用效果,以及其在評估自然感染與疫苗接種后免疫響應方面的差異。



結語



本研究成功展示了SPR技術在測量肺炎球菌疫苗響應中的應用潛力,為疫苗效果的評估提供了新視角。隨著技術的不斷發展和完善,SPR技術有望在疫苗研發和臨床管理中發揮越來越重要的作用。



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